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            基礎(chǔ)信息Product information
            產(chǎn)品名稱:

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞

            產(chǎn)品簡介:

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:A型流感病毒蛋白PA-X抗體 FAM21C蛋白抗體 蛋白激酶C相關(guān)激酶1抗體 人骨髓單個核細胞 兔血管外膜成纖維細胞 OAW42人卵巢癌細胞? NIH/3T3 (小鼠胚胎細胞)

            產(chǎn)品型號:

            廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

            訪問量:552

            更新時間:2025-04-09

            產(chǎn)品特性Product characteristics

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞

            商品屬性:

            組織來源

            產(chǎn)品規(guī)格

            細胞形態(tài)

            貨號

            肝臟組織

            5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

            上皮細胞樣

            YS-01X7168

            細胞簡介:

            人肝內(nèi)膽管上皮分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收,在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復(fù)雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明,常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位,進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。

            方法簡介:

            公司實驗室分離的人肝內(nèi)膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

            質(zhì)量檢測:

            公司實驗室分離的人肝內(nèi)膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

            培養(yǎng)信息:

            包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

            培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

            換液頻率 每2-3天換液一次

            生長特性 貼壁

            細胞形態(tài) 上皮細胞樣

            傳代特性 可傳2-3

            消化液 0.25%

            培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞

            細胞傳代及凍存:

            細胞傳代步驟細胞凍存步驟
            如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

            原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

              ① 組織塊培養(yǎng)法

              組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

              ② 消化培養(yǎng)法

              ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

              對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

              ④器官培養(yǎng)

              器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞


            公司正在出售的產(chǎn)品:

            兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

            兔子組織因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

            兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

            兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

            小鼠苯(LPA)ELISA 試劑盒 96T/48T

            Human general anscription complex (GTC) ELISA Kit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)試劑盒

            HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4ELISAKit 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

            Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1試劑盒人癌易感蛋白1(BRCA-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

            植物組織細胞核高分離試劑盒10

            HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

            胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白2抗體

            周期素依賴性激酶9抗體

            LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein

            NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神經(jīng)纖維瘤抗原

            TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein

            GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白

            CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)

            NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神經(jīng)纖維瘤抗原

            GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白

            LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein

            CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)

            TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein

            人肝內(nèi)膽管上皮細胞大鼠血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(PECAM1)試劑盒 ,英文名: PECAM1 ELISA Kit

            Mouse coagulation (F x) ELISA Kit 小鼠Ⅹ(F)試劑盒

            MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

            CLIAKitforHumancoagulationfactorIX,FIXELISAKit人Ⅸ

            細胞CDK5/P35激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

            ELISAKitCR大鼠鈣結(jié)合蛋白

            原代細胞的培養(yǎng)條件:

              一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

              1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

              2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

              3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

              4、 胎牛血清濃度為10%-80%

              5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

              6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

              7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

              8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

              二、懸浮細胞培養(yǎng)

              1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

              2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

              3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

              4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

              5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

              6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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