17羥孕酮ELISA試劑盒在使用方面有著怎樣的技巧呢？

　　17羥孕酮elisa試劑盒是用于定量測量樣本中17羥孕酮（17-OHP）含量的實驗工具。采用了競爭性抑制酶免疫分析技術(shù)或雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附法。在檢測過程中，特異性抗體與樣本中的17-OHP發(fā)生競爭性結(jié)合反應(yīng)，通過酶標(biāo)儀測量反應(yīng)后的顏色深淺來間接反映樣本中17-OHP的濃度。

　　17羥孕酮ELISA試劑盒的使用注意事項如下：

　　1、試劑與樣本處理：

　　所有試劑在使用前應(yīng)達(dá)到室溫（20-25℃），以避免溫度變化對反應(yīng)的影響。

　　樣本在收集后應(yīng)盡快進行處理，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致樣本質(zhì)量下降。例如，血清和血漿樣本在離心后應(yīng)迅速分離，并盡快進行實驗或分裝保存。

　　不能檢測含NaN3的樣品，因為NaN3會抑制辣根過氧化物酶（HRP）的活性，影響實驗結(jié)果。

　　2、避免交叉污染：

　　在實驗過程中，應(yīng)小心操作，避免不同試劑或樣本之間的交叉污染。

　　使用一次性手套、吸頭等耗材，并在每次更換樣本或試劑時更換新的吸頭。

　　封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　3、控制實驗條件：

　　確保實驗環(huán)境的溫濕度穩(wěn)定，避免強光直接照射和電磁干擾。

　　使用高精度的儀器和設(shè)備，如酶標(biāo)儀，以提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

　　4、試劑保存：

　　試劑盒中的試劑應(yīng)在規(guī)定的條件下保存，如2-8℃冷藏，避免高溫、潮濕和陽光直射。

　　濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

　　底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子；底物B對光敏感，應(yīng)避光保存。

　　5、加樣與洗滌：

　　加樣時應(yīng)將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

　　各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。

　　6、顯色與測定：

　　顯色劑應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

　　在加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果，避免顏色變化影響實驗結(jié)果。

　　測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行，以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。

　　7、廢棄物處理：

　　實驗過程中產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)按照實驗室規(guī)定進行分類處理，避免對環(huán)境造成污染。

　　所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理，特別是當(dāng)樣本中存在可能傳播疾病的病原體時。

　　8、特殊樣本處理：

　　對于某些特殊類型的樣本（如細(xì)胞培養(yǎng)上清），由于干擾因素較多，可能需要額外的預(yù)處理步驟或采用特定的檢測方法。

　　如果血清中大量顆粒，檢測前應(yīng)先離心或過濾。