PCR檢測試劑盒的使用技巧有哪些呢？

　　PCR檢測試劑盒引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

　　PCR檢測試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)檢測，可用于檢測各種待檢標(biāo)本(如血液、糞便、食物、生物材料等)中所感染的特定細(xì)菌或病毒的某一特定基因，進(jìn)而確定該細(xì)菌或病毒的感染/污染狀態(tài)。試劑盒中所含引物能特異性擴(kuò)增該細(xì)菌或者病毒的保守區(qū)域，不會(huì)交叉擴(kuò)增細(xì)胞基因組。與傳統(tǒng)的選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)檢測方法和免疫血清學(xué)檢測方法相比較，本方法更為快速，特異性更高。

　　PCR檢測試劑盒的使用技巧：

　　一、稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）

　　1、注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA段作為陽性對(duì)照。

　　2、標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。

　　3、用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。

　　4、在7號(hào)管中加入5μL1×10E8拷貝/μL的陽性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

　　5、換槍頭，在6號(hào)管中加入5μL1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

　　6、換槍頭，在5號(hào)管中加入5μL1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。

　　7、重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。